concepts et méthodes

Personnes concernées

Formation générale destinée à toute personne désirant acquérir les bases de l'enzymologie ou désirant se recycler, et possédant des connaissances en biochimie structurale.

Objectifs

Ce stage permet au participant :

• d'acquérir les notions fondamentales de l'enzymologie,
• de déterminer, à partir de résultats expérimentaux, les grandeurs cinétiques de bases en enzymologie (vi, K M , V MAX , K I , AS, etc.),
• de comprendre et maîtriser les « kits » de dosage d'une enzyme ou d'un substrat par méthode enzymatique,
• de mettre au point une méthode de détermination d'activité enzymatique ou du dosage d'un substrat par méthode enzymatique

Programme

Théorie :

• Catalyseurs et activation des réactions. Enzymes : interactions récepteur ligand, notions de site actif et de co-facteur, classes d'enzymes
• La cinétique enzymatique : notion de vitesse initiale (vi) constante de Michaëlis (K M ), vitesse maximale (V MAX ) et activité spécifique (AS).
• Influence de la concentration du substrat et de l'enzyme sur la cinétique enzymatique.
• Régulation enzymatique : les différents types d'inhibiteurs, constante d'inhibition (K I ).

Travaux dirigés :

• Courbes cinétiques et calcul de la vitesse de réaction.
• Détermination de la constante de Michaëlis, des constantes d'inhibition et de l'activité spécifique.
• Dosage d'un substrat par voie enzymatique : méthode cinétique ou en point final.
• Analyse de « kits » : justification des réactifs, des conditions opératoires, de la limite de linéarité et des calculs.
• Mise au point d'une méthode enzymatique.

Travaux pratiques :

• Réalisation de la méthode mise en oeuvre précédemment.

Sanction de la formation

Cette formation donne lieu à la délivrance d'une attestation de participation.

Une évaluation en fin de formation permet de mesurer l'atteinte des objectifs et la satisfaction des stagiaires.

Responsables scientifiques

M. Alain BERNARD , Professeur certifié en Biochimie et Génie Biologique, IUT Louis Pasteur

Courriel : alain.bernard@iutlpa.u-strasbg.fr